掃描電子顯微鏡電子器發射出的電子束經過聚焦后匯聚成點光源;點光源在加速電壓下形成高能電子束;高能電子束經由兩個電磁透鏡被聚焦成直徑微小的光點,在透過較為后一級帶有掃描線圈的電磁透鏡后,電子束以光柵狀掃描的方式逐點轟擊到樣品表面,同時激發出不同深度的電子信號。此時,電子信號會被樣品上方不同信號接收器的探頭接收,通過放大器同步傳送到電腦顯示屏,形成實時成像記錄(圖a)。由入射電子轟擊樣品表面激發出來的電子信號有:俄歇電子(Au E)、二次電子(SE)、背散射電子(BSE)、X射線(特征X射線、連續X射線)、陰極熒光(CL)、吸收電子(AE)和透射電子(圖b)。每種電子信號的用途因作用深度而異。掃描電子顯微鏡觀測電疇是通過對樣品表面預先進行化學腐蝕來實現的 。重慶推薦的掃描電鏡服務
掃描電鏡成像系統。電子經過一系列電磁透鏡成束后,打到樣品上與樣品相互作用,會產生次級電子、背散射電子、俄歇電子以及X射線等一系列信號。所以需要不同的探測器譬如次級電子探測器、X射線能譜分析儀等來區分這些信號以獲得所需要的信息。雖然X射線信號不能用于成像,但習慣上,仍然將X射線分析系統劃分到成像系統中。 有些探測器造價昂貴,比如Robinsons式背散射電子探測器,這時,可以使用次級電子探測器代替,但需要設定一個偏壓電場以篩除次級電子。山東靠譜的掃描電鏡哪家效果好掃描電鏡的工作原理是用一束極細的電子束掃描樣品。
掃描電鏡觀察生物試樣。因電子照射而發生試樣的損傷和污染程度很小。同其他方式的電子顯微鏡比較,因為觀察時所用的電子探針電流小(一般約為10- 10~10- 12A)電子探針的束斑尺寸小(通常是5 nm到幾十納米),電子探針的能量也比較小(加速電壓可以小到2 kV),而且不是固定一點照射試樣,而是以光柵狀掃描方式照射試樣,因此,由于電子照射而發生試樣的損傷和污染程度很小,這一點對觀察一些生物試樣特別重要。掃描式電子顯微鏡(SEM)中的電子束盡量聚焦在樣本的一小塊地方,然后一行一行地掃描樣本。入射的電子導致樣本表面散發出電子,顯微鏡觀察的是這些每個點散射出來的電子。由于這樣的顯微鏡中電子不必透射樣本,因此其電子加速的電壓不必非常高。場發射掃描電子顯微鏡是一種比較簡單的電子顯微鏡,它觀察樣本上因強電場導致的場發射所散發出來的電子。
掃描電子顯微鏡的制造是依據電子與物質的相互作用。當一束高能的入射電子轟擊物質表面時,被激發的區域將產生二次電子、俄歇電子、特征x射線和連續譜X射線、背散射電子、透射電子,以及在可見、紫外、紅外光區域產生的電磁輻射。同時,也可產生電子-空穴對、晶格振動(聲子)、電子振蕩(等離子體)。原則上講,利用電子和物質的相互作用,可以獲取被測樣品本身的各種物理、化學性質的信息,如形貌、組成、晶體結構、電子結構和內部電場或磁場等等。掃描電子顯微鏡正是根據上述不同信息產生的機理,采用不同的信息檢測器,使選擇檢測得以實現。如對二次電子、背散射電子的采集,可得到有關物質微觀形貌的信息;對X射線的采集,可得到物質化學成分的信息。 英瀚斯生物掃描電鏡檢測,包含樣本處理、電鏡拍照、數據分析!
掃描電鏡樣本臨界點干燥法 臨界點干燥法是利用物質在臨界狀態時,其表面張力等于零的特性,使樣品的液體完全汽化,并以氣體方式排掉,來達到完全干燥的目的。這樣就可以避免表面張力的影響,較好地保存樣品的微細結構。此法操作較為方便,所用的時間也不算長,一般約2~3小時即可完成,所以是較為為常用的干燥方法。但用此法, 需要特殊儀器設備。臨界點干燥是在臨界點干燥儀中進行的,操作步驟如下: a.固定、脫水:按常規方法進行。如樣品是用乙醇脫水的,在脫水至100%后,要用純acetone置換15~20分鐘。 b.轉入中間液:由純acetone轉入中間液醋酸異戊酯中,時間約15~30分鐘。 c.移至樣品室:將樣品從醋酸異戊酯中取出,放入樣品盒,然后移至臨界點干燥儀的樣品室內,蓋上蓋并擰緊以防漏氣。 d.用液體二氧化碳置換醋酸異戊酯:在達到臨界狀態(31℃, 72.8大氣壓)后,將溫度再升高10℃,使液體二氧化碳氣化,然后打開放氣閥門,逐漸排出氣體,樣品即完全干燥。 英瀚斯生物組織樣本、細胞樣本、材料掃描電鏡檢測!湖南推薦的掃描電鏡哪家靠譜
掃描電子顯微鏡的放大倍數范圍很寬(從5到20萬倍連續可調) ,且一次聚焦好后即可連續觀察,不用重新聚焦。重慶推薦的掃描電鏡服務
掃描電鏡操作基本步驟 1 、取材 掃描電鏡下觀察的樣品尺寸要求比較寬松,一般1cm3左右樣品都能適合大多數掃描電鏡觀察。 2 、固定 鋪片培養的細胞取出浸入 PBS 中,漂洗細胞表面。然后將細胞鋪片放入青霉素小瓶中,加 4 ℃ 預冷的 3% 戊二醛,在 4 ℃ 固定 2h 或過夜,吸出固定劑,用 PBS 浸洗 2 次,每次 10min ,再用 4 ℃ 預冷的 1% 鋨酸。在 4 ℃ 固定 1h ,然后用 PBS 浸洗 2 次,每次 10min 。 3 、脫水 acetone / 醋酸異戊酯( 1 : 1 )脫水 10min ,接下來醋酸異戊酯脫水 30min ,或用系列梯度酒精( 30% 、 50% 、 70% 、 80% 、 90% 、 95% 、 100% )脫水,每種濃度酒精通過 2 次,每次 15min 。 重慶推薦的掃描電鏡服務
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