實驗失敗常見問題分析有哪些：

為什么在顯微鏡下觀察發現所有的切片都成陰性？

答：這種現象主要是由操作不當導致，可能的原因有：1.染色操作不當，致使染色失敗；2.漏加一種抗體或者制備出的抗體沒有活性；3.緩沖液中有疊氮化鈉，抑制了酶的活性；4.復染或脫水劑使用不當等。建議逐一排查，找到原因后重新進行實驗。

在顯微鏡下觀察發現所有的切片都成陽性，這是為什么？答：與上一個問題類似，出現的原因也是試驗操作存在問題，可能的原因有：1.切片在染色過程中抗體過濃，或者干片了；使用的呈色底物溶液已變色或呈色反應時間過長；3.抗體溫育的時間過長等。

在顯微鏡下觀察發現切片的背景很深，這是為什么？答：以下幾方面會導致切片的背景過深：1.蛋白質封閉不夠或所用血清溶血，造成抗體的非特異性反應；2.內源性過氧化酶沒有完全阻斷，顯色過程中過氧化酶與酶底物反應，造成背景；3.底物呈色反應時間過長或呈色反應后漂洗不徹底。 免疫組化公司哪家好？甘肅做得好的免疫組化怎么樣

關于免疫組化，抗體和抗原之間的結合具有高度的特異性，免疫組織化學正是利用了這一原理。先將組織或細胞中的某種化學物質提取出來，以此作為抗原或半抗原，通過免疫動物后獲得特異性的抗體，再以此抗體去探測組織或細胞中的同類的抗原物質。由于抗原與抗體的復合物是無色的，因此還必須借助于組織化學的方法將抗原抗體結合的部位顯示出來，以其達到對組織或細胞中的未知抗原進行定性，定位或定量的研究。南京英瀚斯生物科技有限公司有設計免疫組化的實驗哦！如果您對此有希望了解更多，可以與我們聯系！河北小鼠免疫組化推薦免疫組化相關知識匯總。

免疫組化分類中免疫酶標方法，英瀚斯生物為您介紹。免疫酶標方法是繼免疫熒光后，于60年代發展起來的技術。基本原理是先以酶標記的抗體與組織或細胞作用，然后加入酶的底物，生成有色的不溶性產物或具有一定電子密度的顆粒，通過光鏡或電鏡，對細胞表面和細胞內的各種抗原成分進行定位研究。免疫酶標技術是目前定位準確、對比度好、染色標本可長期保存，適合于光、電鏡研究等。免疫酶標方法的發展非常迅速，已經衍生出了多種標記方法，目前在病理診斷中廣為使用的當屬***法（過氧化物酶-抗過氧化物酶）、ABC法（卵白素-生物素-過氧化物酶復合物）、SP法（鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶）、即用型二步法（聚合物鏈接）等。

免疫組化分類中，免疫熒光方法，英瀚斯生物為您進行介紹。一開始建立的免疫組織化學技術。它利用抗原抗體特異性結合的原理，先將已知抗體標上熒光素，以此作為探針檢查細胞或組織內的相應抗原，在熒光顯微鏡下觀察。當抗原抗體復合物中的熒光素受激發光的照射后即會發出一定波長的熒光，從而可確定組織中某種抗原的定位，進而還可進行定量分析。由于免疫熒光技術特異性強、靈敏度高、快速簡便，所以在臨床病理診斷、檢驗中應用比較廣。動物、細胞的免疫組化、免疫熒光，就找英瀚斯生物！

免疫組化在什么情況下進行組織抗原修復，抗原修復的條件是什么？ 

（1）由于組織中部分抗原在甲醛或多聚甲醛固定過程中，發生了蛋白之間交聯及醛基的封閉作用，從而失去抗原性。通過抗原修復，使得細胞內抗原決定族重新暴露，提高抗原檢測率。

（2）修復方法從強到弱一般分為三種，高壓修復、微波修復、胰酶修復。修復液也分為若干種（具體的可以查閱相關資料，大量的：中性的、高pH的等）。

（3）微波修復，我們一般用6min*4次，效果不錯。

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確定來源不明的轉移瘤的原發部位，臨床上免疫組化也可以進行操作。對于來源不明的轉移瘤，用免疫組化技術有助于確定惡性cancer的組織學來源，進一步確定原發部位。如角蛋白抗體(CK20)在胃腸道cancer、膽管cancer、胰腺cancer中陽性，而在肺cancer、乳腺cancer、腎cancer中陰性;Tg陽性可考慮甲狀腺轉移;波形蛋白(Vimentin)陽性支持肉瘤的診斷;前列腺特異性抗原(PSA)陽性可考慮前列腺轉移;甲狀腺球蛋白陽性可考慮甲狀腺濾泡細胞cancer;肌動蛋白(Actin)、肌球蛋白(Myosin)、結蛋白(Desmin)、肌紅蛋白(Myoglobin)陽性可考慮橫紋肌肉瘤;S-100蛋白陽性支持黑色素瘤的診斷;等等這些都為cancer的醫療及預后提供了依據。甘肅做得好的免疫組化怎么樣

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