參考原理:血液中單個蛋白質(zhì)分子的檢測有助于識別許多新的診斷性蛋白質(zhì)標記物。我們報告了一種同時檢測數(shù)百至數(shù)千個單獨蛋白質(zhì)分子的方法,該方法能夠檢測到非常低濃度的蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)被捕獲在顯微珠上,并用酶標記,每個顯微珠上有一個或零個酶標記的蛋白質(zhì)。通過將這些顯微珠分離成50飛米的陣列反應(yīng)室,單個蛋白質(zhì)可以通過熒光想象檢測到。通過單化這些陣列中的分子,~10-20種酶可以在100μL(~10?19M)中檢測到。單個基于酶標記的分子酶聯(lián)免疫吸附試驗(數(shù)字ELISA)能夠檢測血清中臨床相關(guān)的蛋白質(zhì),其濃度(<10?15M)遠低于傳統(tǒng)ELISA3-5。數(shù)字ELISA在所有接受防冶性前列腺切除術(shù)的患者血清中檢測到前列腺特異性抗原,比較低至14fmol/mL(0.4fmol)。
芯棄疾JX-8B單分子小型化ELISA檢測產(chǎn)品,每個生物實驗室都能用的單分子檢測;哪些是數(shù)字ELISA準確寬
芯棄疾JX-8B數(shù)字化高靈敏ELISA芯片檢測產(chǎn)品;應(yīng)用范圍:各種高靈敏多重免疫檢測,可替代各種ELISA試劑盒,及其他免疫檢測產(chǎn)品。生物實驗室、醫(yī)學(xué)實驗室常見問題:多指標(如細胞因子)要檢測多次;常規(guī)檢測方法(ELISA、化學(xué)發(fā)光)等,不能進行多重檢測;同一個樣本要測試多個指標,就得測試多次,即增加成本、時間,也浪費了樣本和試劑。
芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA高敏檢測產(chǎn)品;先進新型的單分子檢測方法的普及版;每個生物/醫(yī)學(xué)實驗室都用得起的單分子免疫檢測;使用現(xiàn)有平臺就能做的單分子免疫檢測;
亞皮克級數(shù)字ELISA產(chǎn)品芯棄疾JX-8B單分子普惠化ELISA檢測產(chǎn)品,人人都用能得起的單分子檢測;
芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品
每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測
單分子酶檢測到的比較低酶分子數(shù)假設(shè)蛋白質(zhì)檢測分析的更終靈敏度為背景信號可能由非特異性相互作用產(chǎn)生。為了評估內(nèi)在敏感性,我們通過將400,000個帶有生物素的珠子與不同濃度的酶綴合物鏈霉親和素-阝-半乳糖苷酶(S阝G)混合,創(chuàng)建了具有明確酶與珠子比例的珠子群體。為了方便起見,生物素化珠子是通過將生物素化DNA與功能化的珠子雜交提供的。互補DNA。[我們注意到,該實驗不應(yīng)被視為敏感的DNA檢測;該檢測的敏感性受到非特異性相互作用的限制,如補充圖2所示,這些相互作用發(fā)生在酶綴合物和表面結(jié)合的DNA之間。
創(chuàng)新性的解決方案:芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA
我公司推出的數(shù)字化高靈敏ELISA芯片檢測產(chǎn)品應(yīng)用場景:適合生物實驗室、醫(yī)學(xué)實驗室、科研市場、產(chǎn)品預(yù)研、產(chǎn)品開發(fā)、ELISA檢測、動物病情檢測等各種應(yīng)用場景應(yīng)用范圍:各種高靈敏多重免疫檢測,可替代各種ELISA試劑盒,及其他免疫檢測產(chǎn)品。
光纖束購自SchottNorthAmericaouthbri,非增強型光澤硅片購自SpecialtyManufacturing(Saginaw,NatBiotechnol.作者手稿;可在PMC2010年12月1日獲得。Rissin等人,第7頁鹽酸、無水乙醇和分子生物學(xué)級別的吐溫-20均購自西格瑪-奧德里奇(圣路易斯,密蘇里州)。2.7-μm-二羧基磁珠購自瓦里安公司(加利福尼亞州萊克福斯特)。單克隆抗人TNF-α捕獲抗體、多克隆抗人TNF-α檢測試劑和重組人TNF-α均購自R&DSystems(Minneapolis,MN)。單克隆抗PSA捕獲抗體、單克隆抗PSA檢測試劑和純化的PSA購自BiosPacific(埃默里維爾,加利福尼亞州);使用標準方法將檢測試劑抗體生物素化。1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)、N-羥基磺基琥珀酰亞胺(NHS)和SuperBlock®T-20封閉緩沖液購自ThermoScientific(Rockford,IL)。純化DNA購自綜合DNA技術(shù)公司(Coralville,IA)。 單分子陣列化技術(shù)通過微米級結(jié)構(gòu)與二次流原理,穩(wěn)定捕獲磁珠,構(gòu)建 “芯片實驗室” 模式。
創(chuàng)新性的解決方案:芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA應(yīng)用范圍:各種高靈敏多重免疫檢測,可替代各種ELISA試劑盒,及其他免疫檢測產(chǎn)品。循環(huán)血液轉(zhuǎn)化為~2×10?15M(或2飛摩爾,fM);早期HIV傳染血清中每mL含有10-3000個病毒顆粒,相當于p24抗原濃度范圍為從50×10?18M(50attomolar,aM)到15×10?15M(15fM)10.嘗試開發(fā)能夠測量這些蛋白質(zhì)濃度的方法集中在蛋白質(zhì)上的核酸標記復(fù)制,11,12或測量整體、結(jié)合標記蛋白分子的性質(zhì)13-16。Mirkin等人12,17及其他研究者18使用基于金納米顆粒和DNA生物條形碼的標記物,已將蛋白質(zhì)的檢測范圍擴展至低飛摩爾水平;更近使用該技術(shù)的一篇報道展示了檢測到10飛摩爾PSA插入物17。這些方法所達到的靈敏度然而,檢測蛋白質(zhì)仍然落后于核酸,如聚合酶鏈反應(yīng)(PCR),從而限制了蛋白質(zhì)組中具有已在血液中檢測到6,19。單個蛋白質(zhì)分子的分離和檢測為測量極低濃度的蛋白質(zhì)s1,2提供了一種有希望的方法。 芯棄疾JX-8B單分子普惠化ELISA檢測產(chǎn)品,微量檢測,使用微量樣本就能測試;哪些是數(shù)字ELISA準確寬
芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA,人人都用能得起的單分子檢測;哪些是數(shù)字ELISA準確寬
創(chuàng)新性的解決方案:芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA
我公司推出的數(shù)字化高靈敏ELISA芯片檢測產(chǎn)品應(yīng)用場景:適合生物實驗室、醫(yī)學(xué)實驗室、科研市場、產(chǎn)品預(yù)研、產(chǎn)品開發(fā)、ELISA檢測、動物病情檢測等各種應(yīng)用場景應(yīng)用范圍:各種高靈敏多重免疫檢測,可替代各種ELISA試劑盒,及其他免疫檢測產(chǎn)品。
我們繼續(xù)在兩個關(guān)鍵領(lǐng)域改進SiMoA技術(shù)。首先,在兩個關(guān)鍵領(lǐng)域可能再增加兩個靈敏度等級基于對酶標記的敏感性(圖2)可以檢測蛋白質(zhì),如果非特異性相互作用可以更小化背景信號。單個珠子上分離和詢問單個分子的能力為區(qū)分抗體-抗原結(jié)合事件和非特異性結(jié)合復(fù)合物。其次,我們簡化了檢測的物流。然而,即使在目前的形式下,我們相信數(shù)字ELISA有可能促進疾病的早期診斷和治理。 哪些是數(shù)字ELISA準確寬