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逆轉(zhuǎn)錄病毒生命周期的兩個(gè)獨(dú)特步驟，即逆轉(zhuǎn)錄和整合，是慢病毒載體功能的重要組成部分。脫殼后，剩余的病毒核酸和蛋白復(fù)合物稱為逆轉(zhuǎn)錄復(fù)合物（RTC），RTC通過主動(dòng)運(yùn)輸進(jìn)入細(xì)胞核。轉(zhuǎn)運(yùn)過程中，病毒RNA在RTC中通過以下方式逆轉(zhuǎn)錄為前病毒DNA。首先tRNA與病毒RNA基因組5'端引物結(jié)合位點(diǎn)（primer binding site，PBS）結(jié)合，并生成一個(gè)短片段的反義單鏈DNA，稱為強(qiáng)終止拷貝DNA（strong-stop copy DNA，sscDNA）。該sscDNA段隨后被轉(zhuǎn)移至病毒RNA的3'端，作為合成負(fù)鏈DNA的引物。在此過程中，重建了病毒生命周期必不可少的U3RU5序列。ELISA試...

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：建議先做幾個(gè)孔摸索接種細(xì)胞的數(shù)量和加入CCK-8試劑后的培養(yǎng)時(shí)間。有條件的情況下建議采用多通道移液器，可以減少平行孔間的差異。加入CCK-8試劑時(shí)，建議斜貼著培養(yǎng)板壁加，不要插到培養(yǎng)基頁面下加，容易產(chǎn)生氣泡，會(huì)干擾OD值讀數(shù)。白細(xì)胞可能需要培養(yǎng)較長時(shí)間。當(dāng)使用標(biāo)準(zhǔn)96孔板時(shí)，貼壁細(xì)胞的*小接種量至少為1,000 個(gè)/孔 (100 μL 培養(yǎng)基)。檢測(cè)白細(xì)胞時(shí)的靈敏度相對(duì)較低，因此推薦接種量不低于2,500 個(gè)/孔 (100 μL 培養(yǎng)基)。如果要使用24孔板或6孔板實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)先計(jì)算每孔相應(yīng)的接種量，并按照每孔培養(yǎng)基總體積的10%加入CCK-8溶液。如果沒有450nm的濾光片，可...

擴(kuò)增潛力高：每次傳代可實(shí)現(xiàn)10倍以上細(xì)胞擴(kuò)增，14天細(xì)胞數(shù)量達(dá)到1×106；多種培養(yǎng)形式兼容：可在多種容器形式下進(jìn)行各種規(guī)模培養(yǎng)：基質(zhì)膠、低吸附孔板和生物反應(yīng)器懸浮培養(yǎng)；簡(jiǎn)化的工作流程：而無需在培養(yǎng)或傳代過程中使用微載體或細(xì)胞濾網(wǎng)，可在基質(zhì)膠中形成球狀體；較好的成本效益比：GMP級(jí)別生產(chǎn)條件下制備，批次質(zhì)量穩(wěn)定，試劑含量是常規(guī)市售干細(xì)胞培養(yǎng)基的2倍，培養(yǎng)基可通過補(bǔ)液方式維持細(xì)胞生長。14天實(shí)現(xiàn)**類器guan細(xì)胞數(shù)量達(dá)到1×106可實(shí)現(xiàn)手術(shù)組織、穿刺組織及胸腹水來源的樣本很大程度維持非小細(xì)胞肺ai類器guan與體內(nèi)**組織細(xì)胞的生物學(xué)特征及遺傳分子特征。熒光亮度更高，熒光偶聯(lián)物特異性好...

來源于生物體內(nèi)的熒光素，常見的有螢火蟲熒光素酶、海腎熒光素酶和Guassia熒光素酶。這些熒光素酶作為“報(bào)告蛋白”被用于分子生物學(xué)研究中，這種技術(shù)被稱為報(bào)告基因檢測(cè)法或螢光素酶檢測(cè)法（LuciferaseAssay）。跟普通融合蛋白標(biāo)簽不同，使用熒光素酶構(gòu)建的報(bào)告基因可用作目的基因的定量分析。因此常用于研究啟動(dòng)子、miRNA3'UTR克隆的功能與調(diào)控，因?yàn)樗鼈儗?duì)目的基因的調(diào)控可以是漸變的，而不是簡(jiǎn)單的開和關(guān)兩種狀態(tài)。優(yōu)點(diǎn)：靈敏度高，檢測(cè)幅度寬；不是哺乳動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)源性基因；重復(fù)性好；與HTS兼容等。螢火蟲和海腎熒光素酶已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于協(xié)同報(bào)告并進(jìn)行均一化研究。由于它們都是快速，容易和高靈敏的監(jiān)測(cè)...

在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)操作中，加樣是必不可少的項(xiàng)步驟，這步驟在整個(gè)實(shí)驗(yàn)中都有著很大的影響。那么酶聯(lián)免疫加樣步驟問題應(yīng)如何解決處理呢？ 一、加樣問題的可能原因 1.血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 2.手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3.加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。 二、解決方法 1.標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，**后必須立即顛倒**管混合5-10次，放置段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢...

常用的病毒載體有腺病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒和慢病毒。逆轉(zhuǎn)錄病毒載體只能感ran分裂期細(xì)胞，而且容量有限，腺病毒一般不能整合到染色體上，只能進(jìn)行瞬時(shí)感ran。與其它逆轉(zhuǎn)錄病毒相比，慢病毒（LV）具有可以感ran非分裂期細(xì)胞、容納外源性基因片段大，可以長期表達(dá)等xian zhu優(yōu)點(diǎn)。慢病毒不產(chǎn)生任何有效的細(xì)胞免疫應(yīng)答，可作為一種體外基因運(yùn)輸?shù)墓ぞ摺Ｂ《据d體介導(dǎo)的轉(zhuǎn)基因表達(dá)能持續(xù)數(shù)月，且無可觀察到的病理學(xué)現(xiàn)象。慢病毒包裝系統(tǒng)一般由慢病毒表達(dá)載體和慢病毒包裝載體組成。而慢病毒包裝質(zhì)粒可提供所有的轉(zhuǎn)錄并包裝RNA到重組的假病毒載體所需要的所有輔助蛋白。為產(chǎn)生高滴度的病毒顆粒，需要利用表達(dá)載體和包裝質(zhì)粒同時(shí)共轉(zhuǎn)...

自然殺傷（NK）細(xì)胞在識(shí)別和殺死**和病毒感ran的先天和后天免疫反應(yīng)中扮演著關(guān)鍵的角色。因此，已有許多研究嘗試研發(fā)在體外激huo和擴(kuò)增NK細(xì)胞的方法，以用于和免疫細(xì)胞相關(guān)研究，而目前的方法包括使用細(xì)胞因子、化學(xué)試劑以及飼養(yǎng)細(xì)胞1，其中細(xì)胞因子在調(diào)節(jié)NK細(xì)胞的活性中具有核xin作用。據(jù)報(bào)道，IL-2、IL-12、IL-15、IL-18、IL-21和IFN-γ被歸類為NK細(xì)胞的細(xì)胞毒性和增殖的活化細(xì)胞因子，并增強(qiáng)NK細(xì)胞對(duì)各種**的細(xì)胞毒性作用2。然而，這些激huoNK細(xì)胞的細(xì)胞因子組合仍需研究人員進(jìn)一步優(yōu)化。該試劑盒中提供了所有必需的PCR試劑。只需添加DNA模板并進(jìn)行PCR反應(yīng)。...

隨著病毒生物學(xué)的發(fā)展，種類繁多的病毒載體已越來越成為向各種實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)（如細(xì)胞系、原代細(xì)胞、組織臟器等）轉(zhuǎn)運(yùn)核酸的重要工具。除了在實(shí)驗(yàn)室的組織培養(yǎng)和動(dòng)物模型生產(chǎn)中發(fā)揮重要作用，它們還被用于zhi 療遺傳性疾病的臨床試驗(yàn)中。目前主流的病毒載體系統(tǒng)主要包括慢病毒（LV）、（γ-）逆轉(zhuǎn)錄病毒（RV）、腺病毒（Ad）和腺相關(guān)病毒（AAV）。我們分述之。慢病毒和逆轉(zhuǎn)錄病毒均屬于逆轉(zhuǎn)錄病毒科。其典型特征為其RNA基因組能逆轉(zhuǎn)錄為cDNA副本，cDNA副本又能穩(wěn)定整合至宿主細(xì)胞基因組中（這就是常說的穩(wěn)轉(zhuǎn)）。逆轉(zhuǎn)錄病毒通常分兩種：簡(jiǎn)單的（有時(shí)又稱為致ai病毒或γ-逆轉(zhuǎn)錄病毒，如鼠白血病病毒）和復(fù)雜的（如慢病毒）。...

慢病毒載體的研究發(fā)展得很快，研究的也非常深入。該載體可以將外源基因有效地整合到宿主染色體上，從而達(dá)到持久性表達(dá)。在感ran能力方面可有效地感ran神經(jīng)元細(xì)胞、肝細(xì)胞、心肌細(xì)胞、**細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、干細(xì)胞等多種類型的細(xì)胞，從而達(dá)到良好的的基因zhi liao效果，在美國已經(jīng)開展了臨床研究，效果非常理想，因此具有廣闊的應(yīng)用前景。慢病毒也被廣fan地應(yīng)用于表達(dá)RNAi的研究中。由于有些類型細(xì)胞脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染效果差，轉(zhuǎn)移到細(xì)胞內(nèi)的siRNA半衰期短，體外合成siRNA對(duì)基因表達(dá)的抑zhi作用通常是短暫的，因而使其應(yīng)用受到較大的限制。采用事先在體外構(gòu)建能夠表達(dá)siRNA的載體，然后轉(zhuǎn)移到細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)錄siR...

就eGFP而言，相對(duì)于GFP，其熒光強(qiáng)度更強(qiáng)、熒光性質(zhì)更穩(wěn)定。mCherry是從DsRed演化來的性能*好的一個(gè)單體紅色熒光蛋白，可以和GFP系列熒光蛋白共用，實(shí)現(xiàn)多色標(biāo)記。熒光蛋白活性和被融合的目標(biāo)蛋白功能相互沒有明顯影響。這些熒光標(biāo)簽蛋白，其融合表達(dá)目的蛋白后具有以下優(yōu)點(diǎn)：1.不用破碎組織細(xì)胞和不加任何底物，直接通過熒光顯微鏡就能在活細(xì)胞中發(fā)出綠色熒光，實(shí)時(shí)顯示目的基因的表達(dá)情況，而且熒光性質(zhì)穩(wěn)定，被譽(yù)為活細(xì)胞探針。2.其自發(fā)熒光，不需用目的基因的抗體或原位雜交技術(shù)就可推知目的基因在細(xì)胞中的定位等情況。3.同時(shí)細(xì)胞內(nèi)的其它產(chǎn)物不會(huì)干擾標(biāo)簽蛋白檢測(cè)，從而使其檢測(cè)更顯得快速、簡(jiǎn)便、靈敏度高...

WST-1細(xì)胞活力和增殖檢測(cè)試劑盒描述： 通過存在于活細(xì)胞中的琥珀酸四唑還原酶將四唑鎓鹽還原成有色甲compounds化合物，提供了測(cè)量細(xì)胞活力和增殖的靈敏且準(zhǔn)確的方法。然而，*常用的四唑鹽MTT[3-（4,5-二甲基噻唑-2-基）-2,5-二苯基四唑溴化物]的缺點(diǎn)是由MTT產(chǎn)生的甲dye染料極不溶于水，因此分光光度定量需要額外的提取步驟。ScienCell WST-1細(xì)胞活力和增殖測(cè)定使用四唑鹽WST-1[2-（4-碘苯基）-3-（4-硝基苯基）-5-（2,4-二磺苯基）-2H四唑]。WST-1在代謝活性細(xì)胞上產(chǎn)生高度水溶性的福爾馬贊，允許直接和用戶友好的細(xì)胞活力和...

您想要快速、準(zhǔn)確的了解不同處理、來源的組織或細(xì)胞樣品之間某一類信號(hào)通路相關(guān)基因的表達(dá)情況嗎？為簡(jiǎn)化基因分析研究，美國sciencell公司特推出GeneQueryTM qPCR試劑盒，這款產(chǎn)品能夠快速、簡(jiǎn)單的獲得這些不同來源樣品之間您感興趣的信號(hào)通路相關(guān)基因群之間的精確表達(dá)倍數(shù)關(guān)系，并提供后續(xù)基因定量PCR 特異性引物序列信息。該試劑盒主要集中于生物學(xué)途徑、ai癥研究、遺傳性疾病和生物標(biāo)志物等方面的研究，可在一個(gè)96 孔板內(nèi)同時(shí)檢測(cè)96個(gè)相關(guān)基因的表達(dá)，少至0.1ng cDNA 就可快速準(zhǔn)確的檢測(cè)和量化靶基因的表達(dá)。除了該試劑盒，還提供單獨(dú)的引物進(jìn)行基因表達(dá)分析，這些引物組能特異性地識(shí)別和...

化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)的優(yōu)勢(shì)1.靈敏度高：靈敏度高是化學(xué)發(fā)光免疫分析關(guān)鍵的優(yōu)越性。化學(xué)發(fā)光免疫分析能夠檢出放射性免疫分析和酶聯(lián)免疫分析等方法無法檢出的物質(zhì)，對(duì)疾病的早期診斷具有十分重要的意義。2.寬的線性動(dòng)力學(xué)范圍：發(fā)光強(qiáng)度在4-6個(gè)量級(jí)之間，與測(cè)定物質(zhì)濃度間呈線性關(guān)系。這與顯色酶聯(lián)免疫分析吸光度（OD值）2.0的范圍相比，優(yōu)勢(shì)明顯。雖然同位素放射免疫也有較寬的線性動(dòng)力學(xué)范圍，但是放射性限制其應(yīng)用。3.光信號(hào)持續(xù)時(shí)間長：化學(xué)發(fā)光免疫分析的光信號(hào)持續(xù)時(shí)間可達(dá)數(shù)小時(shí)甚至一tian，簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作及測(cè)量。4.分析方法簡(jiǎn)便快速：絕大多數(shù)分析測(cè)定jin需加入一種試劑（或符合制劑）的一步模式。5.結(jié)果穩(wěn)定、...

CCK8試劑盒提供了一種靈敏度高，操作簡(jiǎn)便，使用安全，重現(xiàn)性好的細(xì)胞增殖與活性檢測(cè)方法。與傳統(tǒng)的MTT相比無需有機(jī)溶劑和放射性同位素，步驟少，無損失，結(jié)果準(zhǔn)確！本試劑盒檢測(cè)非常便捷。試劑盒jin一管已經(jīng)配制好的含有WST-8的CCK-8溶液，無須再進(jìn)行任何配制等操作 。無須使用同位素，所有的檢測(cè)步驟jin在同一塊96孔板內(nèi)完成。不必洗滌細(xì)胞，不必收集細(xì)胞，也不必采用額外的步驟去溶解formazan。可以用于大批量樣品的檢測(cè)。1. MTT實(shí)驗(yàn)生成的甲臜不是水溶性的，需要使用DMSO等有機(jī)溶劑溶解；而本方法產(chǎn)生的甲臜是水溶性的，不僅省去了溶解的步驟，更因此而減少了該操作步驟帶來的誤差。2. 與MT...

注意事項(xiàng)：1、酚紅和血清對(duì)CCK-8法的檢測(cè)不會(huì)造成干擾，可以通過減去空白孔中本底的吸光度而消除。2、CCK-8試劑的顏色為淡紅色，與含酚紅的培養(yǎng)基顏色接近，不注意的話容易產(chǎn)生漏加或多加。3、當(dāng)在培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)板*外一圈的孔容易干燥揮發(fā)，導(dǎo)致體積不準(zhǔn)確而增加誤差。一般情況下，*外一圈的孔只加培養(yǎng)基，不作為測(cè)定孔用。4、金屬對(duì)CCK-8顯色有影響：終濃度為1mM的氯化亞鉛、氯化鐵、硫酸銅會(huì)5%、15%、90%的抑zhi顯色反應(yīng)，使靈敏度降低。如果終濃度是10mM，將會(huì)100%抑zhi顯色反應(yīng)。5、部分懸浮細(xì)胞由于染色比較困難，一般需要增加細(xì)胞數(shù)量并延長培養(yǎng)時(shí)間。熒光亮度更高，熒光偶...

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您想要快速、準(zhǔn)確的了解不同處理、來源的組織或細(xì)胞樣品之間某一類信號(hào)通路相關(guān)基因的表達(dá)情況嗎？為簡(jiǎn)化基因分析研究，美國sciencell公司特推出GeneQueryTM qPCR試劑盒，這款產(chǎn)品能夠快速、簡(jiǎn)單的獲得這些不同來源樣品之間您感興趣的信號(hào)通路相關(guān)基因群之間的精確表達(dá)倍數(shù)關(guān)系，并提供后續(xù)基因定量PCR 特異性引物序列信息。該試劑盒主要集中于生物學(xué)途徑、ai癥研究、遺傳性疾病和生物標(biāo)志物等方面的研究，可在一個(gè)96 孔板內(nèi)同時(shí)檢測(cè)96個(gè)相關(guān)基因的表達(dá)，少至0.1ng cDNA 就可快速準(zhǔn)確的檢測(cè)和量化靶基因的表達(dá)。除了該試劑盒，還提供單獨(dú)的引物進(jìn)行基因表達(dá)分析，這些引物組能特異性地識(shí)別和...

ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí)，受檢標(biāo)本（測(cè)定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果，使測(cè)定方法達(dá)到很...

ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí)，受檢標(biāo)本（測(cè)定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果，使測(cè)定方法達(dá)到很...

人抗補(bǔ)體1q抗體(C1q)ELISA試劑盒(CTX)ELISA試劑盒對(duì)體內(nèi)各種重要生理功能的實(shí)現(xiàn)以及疾病的發(fā)生進(jìn)程不可或缺，如造血作用、淋巴組織發(fā)育、炎癥反應(yīng)、白細(xì)胞遷移、過敏、傷口修復(fù)、新血管生成、cancer發(fā)生和**遷移等。顧名思義，人抗補(bǔ)體1q抗體(C1q)ELISA試劑盒(CTX)ELISA試劑盒的功能主要是趨化各種細(xì)胞。典型的例子，如人抗補(bǔ)體1q抗體(C1q)ELISA試劑盒(CTX)ELISA試劑盒通過趨化作用向炎癥部位招募各種白細(xì)胞。 其中包括兩個(gè)步驟：首先是白細(xì)胞在血管內(nèi)皮細(xì)胞表面的初始性滾動(dòng)轉(zhuǎn)換成穩(wěn)定性結(jié)合，并穿越血管內(nèi)皮細(xì)胞層；然后，引導(dǎo)這些細(xì)胞向gan染部...

來源于生物體內(nèi)的熒光素，常見的有螢火蟲熒光素酶、海腎熒光素酶和Guassia熒光素酶。這些熒光素酶作為“報(bào)告蛋白”被用于分子生物學(xué)研究中，這種技術(shù)被稱為報(bào)告基因檢測(cè)法或螢光素酶檢測(cè)法（LuciferaseAssay）。跟普通融合蛋白標(biāo)簽不同，使用熒光素酶構(gòu)建的報(bào)告基因可用作目的基因的定量分析。因此常用于研究啟動(dòng)子、miRNA3'UTR克隆的功能與調(diào)控，因?yàn)樗鼈儗?duì)目的基因的調(diào)控可以是漸變的，而不是簡(jiǎn)單的開和關(guān)兩種狀態(tài)。優(yōu)點(diǎn)：靈敏度高，檢測(cè)幅度寬；不是哺乳動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)源性基因；重復(fù)性好；與HTS兼容等。螢火蟲和海腎熒光素酶已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于協(xié)同報(bào)告并進(jìn)行均一化研究。由于它們都是快速，容易和高靈敏的監(jiān)測(cè)...

不過也有用單抗做檢測(cè)抗體的情況，尤其是在科研中。雙抗體夾心法具有高靈敏度、高專一性的優(yōu)勢(shì)，但該法只適用于有多個(gè)結(jié)合位點(diǎn)的抗原檢測(cè)，主要用于檢測(cè)各種大分子抗原——例如在醫(yī)學(xué)檢測(cè)中測(cè)定HBsAg、HBeAg、AFP等疾病相關(guān)的，以及在科研中檢測(cè)細(xì)胞因子等。 由于雙抗體夾心法特異性高，在檢測(cè)過程中有時(shí)會(huì)將樣本和酶標(biāo)抗體同時(shí)加入進(jìn)行反應(yīng)，稱為雙抗體夾心一步法，因?yàn)椴僮鲿r(shí)間短，在商業(yè)化生產(chǎn)中有很大優(yōu)勢(shì)。 但雙抗體夾心一步法要特別注意ELISA中的鉤狀效應(yīng)（hook ffect），因?yàn)榇藭r(shí)如果樣本中抗原含量過高會(huì)導(dǎo)致其與固相抗體和酶標(biāo)抗體均有結(jié)合而無法形成“夾心復(fù)合物”，此時(shí)測(cè)出的結(jié)果將低...

1996年第yi次報(bào)道其蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)是一個(gè)包含有11個(gè)β折疊的“桶”形結(jié)構(gòu)，發(fā)色團(tuán)隱藏在結(jié)構(gòu)的中心，不被水溶劑猝滅。這種緊密排列的結(jié)構(gòu)對(duì)整個(gè)GFP蛋白是很重要的，它幾乎可以完全維持熒光活性;少量的斷裂是可以平衡的，少量的點(diǎn)突變也是可以接受的。與當(dāng)時(shí)的傳統(tǒng)熒光染料相比，GFP的主要優(yōu)勢(shì)在于它無毒，并且可以在活細(xì)胞中表達(dá)，從而能夠用于研究動(dòng)態(tài)的生理過程。 幾乎就在它的序列被闡明的同時(shí)，科學(xué)家們就開始通過誘導(dǎo)突變來設(shè)計(jì)新的綠色熒光蛋白版本。1995年，RogerY.Tsien描述了一個(gè)S65T點(diǎn)突變，該突變?cè)黾恿薌FP的熒光強(qiáng)度和光穩(wěn)定性。這也使其主激發(fā)峰從395nm轉(zhuǎn)移到488nm，有效地...

慢病毒載體（Lentiviralvector）較逆轉(zhuǎn)錄病毒載體有更廣的宿主范圍，慢病毒能夠有效感ran非周期性和有絲分裂后的細(xì)胞。慢病毒載體能夠產(chǎn)生表達(dá)shRNA的高滴度的慢病毒，在周期性和非周期性細(xì)胞、干細(xì)胞、受精卵以及分化的后代細(xì)胞中表達(dá)shRNA，實(shí)現(xiàn)在多種類型的細(xì)胞和轉(zhuǎn)基因小鼠中特異而穩(wěn)定的基因表達(dá)的功能性沉默，為在原代的人和動(dòng)物細(xì)胞組織中快速而高效地研究基因功能，以及產(chǎn)生特定基因表達(dá)降低的動(dòng)物提供了可能性。慢病毒作為siRNA的攜帶者，不但具備特異性地使基因表達(dá)沉默的能力，而且充分發(fā)揮了慢病毒載體自身所具備的優(yōu)勢(shì)，為基因功能的研究提供了更強(qiáng)有力的工具。慢病毒載體可以將外源基因或外源的...

細(xì)胞結(jié)構(gòu)及功能的研究，是細(xì)胞生物學(xué)的基本課題，其重要的研究手段之一是分離純的亞細(xì)胞組分 。這種拆離的方法，使細(xì)胞中各種生物學(xué)過程彼此分開，互不干擾，便于確定一種復(fù)雜過程中的細(xì)節(jié)，從而深化我們對(duì)細(xì)胞整體功能的認(rèn)識(shí)。 常規(guī)分離提取方法往往一次jin能提取1-2種細(xì)胞組分，同時(shí)不僅對(duì)設(shè)備要求高，而且操作起來費(fèi)時(shí)費(fèi)力，*后的效果還不佳。作為生命科學(xué)領(lǐng)域知ming的解決方案供應(yīng)商，艾美捷科技為您推薦市場(chǎng)上唯yi一款能夠一次性提取4種組分的試劑盒，能夠滿足絕大多數(shù)科研工作者的分離需求，不僅高效便捷，更確保蛋白以及組分的完整。 示蹤試劑盒中所使用的熒光探針具有極低細(xì)胞毒性和無生物活性的特點(diǎn)。小...

hela細(xì)胞*早起源于20世紀(jì)50年代早期的一種高度侵襲性的宮頸ai細(xì)胞，作為第yi個(gè)不朽的人類細(xì)胞系，hela細(xì)胞是目前世界上*受研究者歡迎的細(xì)胞系之一。hela細(xì)胞在培養(yǎng)過程中很容易繁殖，如果hela細(xì)胞污染了其他細(xì)胞，它們很快就會(huì)超過原來的細(xì)胞。因此，hela細(xì)胞污染已成為科學(xué)界的一個(gè)重大課題。由于細(xì)胞系中hela細(xì)胞污染的可能性很高，建議進(jìn)行常規(guī)評(píng)估。 Sciencell的Hela細(xì)胞污染檢測(cè)試劑盒（HLCC）專為敏感、快速和pcr法檢測(cè)人培養(yǎng)細(xì)胞中hela細(xì)胞污染的簡(jiǎn)易方法。hela基因組學(xué)DNA（gdna）檢測(cè)引物集（hld）識(shí)別并放大hela細(xì)胞...

報(bào)告基因被廣泛應(yīng)用于篩選轉(zhuǎn)化的細(xì)胞和組織。在過去的10年里，熒光蛋白已經(jīng)成為活細(xì)胞成像研究中不可或缺的一部分。DsRED是可與其他篩選標(biāo)記進(jìn)行雙標(biāo)記，同時(shí)又能避免植物葉綠素自發(fā)熒光的理想報(bào)告基因。本研究利用含有表達(dá)DsRED的雙元載體pKGWRR轉(zhuǎn)化核桃體細(xì)胞胚，并對(duì)這種紅色熒光蛋白可視報(bào)告基因?qū)ε咛ズ驮偕仓甑挠绊戇M(jìn)行評(píng)估。結(jié)果表明，DsRED熒光強(qiáng)度在7~10d達(dá)到*高，24個(gè)存活的體細(xì)胞胚中有14個(gè)檢測(cè)到紅色熒光。這些E0胚每2周可以獲得25個(gè)全熒光E1胚和43個(gè)全熒光E2胚。DsRED陽性胚的發(fā)芽率達(dá)80%以上，獲得了45株可以檢測(cè)到紅色熒光的轉(zhuǎn)基因核桃植株。再生轉(zhuǎn)基因植株的組織中...