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實驗失敗常見問題分析有哪些： 為什么在顯微鏡下觀察發現所有的切片都成陰性？ 答：這種現象主要是由操作不當導致，可能的原因有：1.染色操作不當，致使染色失敗；2.漏加一種抗體或者制備出的抗體沒有活性；3.緩沖液中有疊氮化鈉，抑制了酶的活性；4.復染或脫水劑使用不當等。建議逐一排查，找到原因后重新進行實驗。 在顯微鏡下觀察發現所有的切片都成陽性，這是為什么？答：與上一個問題類似，出現的原因也是試驗操作存在問題，可能的原因有：1.切片在染色過程中抗體過濃，或者干片了；使用的呈色底物溶液已變色或呈色反應時間過長；3.抗體溫育的時間過長等。 在顯微鏡下觀察發現切片的背景很深，...

免疫組化結果要如何分析？ （1）陽性著色細胞計數法。在40*光鏡下，隨機選擇不重疊的10個視野，機器或人工計數陽性著色細胞，每組3~6張不同動物組織切片，然后進行組間比較即可。 （2）灰密度分析法。可以通過在不同組別和不同動物組織切片上選擇相同區域、相同條件下用image j進行灰密度分析，然后進行統計分析即可。 （3）評分法。用光學顯微鏡下對組織切片分別按染色程度（0~3分為陰性著色、淡黃色、淺褐色、深褐色）、陽性范圍進行評分（1~4分為0~25%、26~50%、51~75%、76~100%），**終可以分數相加，再進行比較。對于以上這幾種方法，各有利弊，請細心選擇。...

免疫組化如何比較大限度地降低組織非特異性染色？ （1）縮短一抗/二抗孵育時間、稀釋抗體來控制。這是重要的一條。 （2）一抗用多克隆抗體易出現非特異性著色，建議試用單克隆抗體看看。 （3）內源性過氧化物酶和生物素在肝臟、腎臟等組織含量很高（含血細胞多的組織），需要通過延長滅活時間和增加滅活劑濃度來降低背景染色； 做病理染色，就找英瀚斯，專業團隊支持。 （4）非特異性組分與抗體結合，這需要通過延長二抗來源的動物免疫血清封閉時間和適當增加濃度來加強封閉效果； （5）縮短DAB孵育時間或降低DAB濃度/過氧化氫濃度等； （6）適當增加PBS沖洗次數...

免疫組化中IHC vs ICC的區別。英瀚斯生物為您說明。除了生物學來源，IHC和ICC在樣品處理的程度上也有所不同。ICC需要透化，要么通過固定過程，要么是單獨的透化步驟，這樣抗體才能與細胞內的靶點相結合。而IHC可能不要單獨的透化步驟，這取決于切片的厚度和固定方法。包埋在石蠟中的IHC切片必須進一步處理，才能進行抗體染色。一旦處理好樣品，IHC和ICC的染色操作就幾乎沒什么差異了。當然，就染色而言，根據所使用的抗體來優化還是少不了的。有沒有推薦的免疫組化外包公司？貴州細胞免疫組化注意事項 免疫組化有哪幾種分類 ？ 1）按標記物質的種類，如熒光染料、放射性同位素、酶（主要有辣根過氧...

免疫組化染色切片的好壞直接影響著病理醫生對其染色結果的判斷，進而影響病理診斷，所以制作一張良好的免疫組化切片至關重要，它需要病理醫生與病理技師兩者間的相互協調，密切配合和共同努力，病理醫生選擇抗體，設置對照，判讀結果，指導技術;而技術人員進行實驗操作，保證染色質量。在免疫組化切片的制作過程存在多個環節，每一環節的失誤都可能影響檢測結果，如抗原保存，蛋白酶消化，增強技術及對抗體的管理、使用和試劑的濃度等等，因此制作一張高質量的免疫組織化學切片是多方面相互配合的結果。南京有靠譜的能做免疫組化的公司嗎？安徽做得好的免疫組化檢測關于免疫組化的封閉：用和二抗來源一致的血清在保濕盒中于37℃孵育15~30...

免疫組化技術有哪些應用？ 定位和定性是免疫組化比較大的優勢。相比于其他蛋白檢測方法，免疫組化具有定位較直接準確、定性靈敏度高，是定位檢測分析優先方法，尤其對于有些因子的轉位研究十分有用。免疫組織化學的臨床應用主要包括以下幾方面：惡性**的診斷與鑒別定性；確定轉移性惡性**的原發部位；對某類**進行進一步的病理分型；軟組織**診斷；為臨床提供治療方案的選擇；近年來，隨著免疫組織化學技術的發展和各種特異性抗體的出現，使許多疑難**得到了明確診斷。免疫組化在**診斷和鑒別診斷中的實用價值受到了普遍的認可，其在低分化或未分化**的鑒別診斷時，準確率可達50%-75%。 英瀚斯生物實驗...

免疫組化原理及實驗步驟——實驗外包。眾所周知，抗體與抗原之間的結合具有高度的特異性。免疫組化正是利用這一特性，即先將組織或細胞中的某些化學物質提取出來，以其作為抗原或半抗原去免疫實驗動物，制備特異性抗體，再用這種抗體（第1抗體）作為抗原去免疫動物制備第二抗體，并用某種酶（常用辣根過氧化物酶）或生物素等處理后再與前述抗原成分結合，形成抗原 - 一抗 - 二抗復合物，將抗原放大，由于抗體與抗原結合后形成的免疫復合物是無色的，因此，還必須借助于組織化學方法將抗原抗體反應部位顯示出來。通過抗原抗體反應及呈色反應，顯示細胞或組織中的化學成分，在顯微鏡下可清晰看見細胞內發生的抗原抗體反應產物，從而能夠在細...

免疫組化技術有哪些應用？ 定位和定性是免疫組化比較大的優勢。相比于其他蛋白檢測方法，免疫組化具有定位較直接準確、定性靈敏度高，是定位檢測分析優先方法，尤其對于有些因子的轉位研究十分有用。免疫組織化學的臨床應用主要包括以下幾方面：惡性**的診斷與鑒別定性；確定轉移性惡性**的原發部位；對某類**進行進一步的病理分型；軟組織**診斷；為臨床提供治療方案的選擇；近年來，隨著免疫組織化學技術的發展和各種特異性抗體的出現，使許多疑難**得到了明確診斷。免疫組化在**診斷和鑒別診斷中的實用價值受到了普遍的認可，其在低分化或未分化**的鑒別診斷時，準確率可達50%-75%。 免疫組化公司哪...

免疫組化如何才能充分脫蠟？ （1）蠟不溶于水，如果脫蠟不干凈，少許蠟存留于切片上，將會引起染色不均勻、陽性物時隱時現、真假難辨、背景染色增加等。為了解決上述的問題，切片在染色前必須徹底脫蠟，目前用于脫蠟的試劑主要是二甲苯，因它脫蠟力強，脫蠟時間較短； （2）脫蠟的時間要根據季節，室溫和試劑的新鮮謀面是在不同。如果在夏天，室溫較高，脫蠟試劑也新鮮，則脫蠟時間不需很多，3-5分鐘就已足夠。如果在冬天，室溫較低，脫蠟試劑也較陳舊，則脫蠟時間需要延長，10-20分鐘或更長。 （3）當天切的切片，燒烤2小時后進行染色，切片帶有溫度進行脫蠟這將可加速脫蠟的過程，如果預先切好烤好的...

免疫組化如何比較大限度地降低組織非特異性染色？ （1）縮短一抗/二抗孵育時間、稀釋抗體來控制。這是重要的一條。 （2）一抗用多克隆抗體易出現非特異性著色，建議試用單克隆抗體看看。 （3）內源性過氧化物酶和生物素在肝臟、腎臟等組織含量很高（含血細胞多的組織），需要通過延長滅活時間和增加滅活劑濃度來降低背景染色； 做病理染色，就找英瀚斯，專業團隊支持。 （4）非特異性組分與抗體結合，這需要通過延長二抗來源的動物免疫血清封閉時間和適當增加濃度來加強封閉效果； （5）縮短DAB孵育時間或降低DAB濃度/過氧化氫濃度等； （6）適當增加PBS沖洗次數...

免疫組化的局限性，可能會有假陽性。陽性信號定位不正確即為假陽性，包括著色不勻、背景著色、邊緣效應，另外組織的某些特定成分也能導致假陽性結果。假陽性可能的原因有:(1)一抗濃度及一抗是否失效，抗體有一個合適的濃度范圍且必須在有效期內使用，過期的抗體或者不著色，或者背景著色，形成假陽性;(2)試劑未充分覆蓋組織，組織邊緣的試劑易干濃度較組織中間高致深染;(3)抗體孵育時間過長，由于室溫的影響夏季孵育時間稍短，冬季孵育時間稍長;(4)操作過程中組織變干，造成組織邊緣收縮或損壞形成偽影，產生假陽性;(5)3，3'-二氨基聯苯胺(DAB)顯色時間太長，DAB宜現配現用，配制時間比較好在30min以內;(...

在臨床應用中，免疫組化還可以進一步分類不同qi官與組織交界處cancer。由于重疊的特征，在一些組織qi官交界處的cancer，只憑組織學基礎對cancer進行分類很困難。如胃腸道梭形細胞肉瘤是肌肉起源的平滑肌肉瘤，是間質起源的胃腸道間質瘤(GIST)，還是神經起源的神經鞘瘤;同樣發生于組織交界處的cancer有睪丸胚胎cancer與精原細胞cancer，兩者較難區別，且醫療與預后明顯的不同，但用免疫組化檢測角蛋白就較易于區別:角蛋白陰性則為精原細胞cancer，而角蛋白陽性則為胚胎cancer。做免疫組化需要多少錢？青海細胞免疫組化可以做什么 免疫組化（IHC）利用抗體檢測組織切片中蛋白質...

免疫組化實驗所用的組織和細胞標本是什么樣的？ 實驗所用主要為組織標本和細胞標本兩大類，前者包括石蠟切片（病理大片和組織芯片）和冰凍切片，后者包括組織印片、細胞爬片和細胞涂片。其中石蠟切片是制作組織標本**常用、**基本的方法，對于組織形態保存好，且能作連續切片，有利于各種染色對照觀察；還能長期存檔，供回顧性研究；石蠟切片制作過程對組織內抗原暴露有一定的影響，但可進行抗原修復，是免疫組化中優先的組織標本制作方法。 英瀚斯生物具有專業病理團隊，染色分析一站搞定！ 免疫組化的那些小知識，都在這里！福建組織免疫組化多少錢確定cancer分期，免疫組化技術應用于臨床可以進行處理哦，英瀚斯...

免疫組化原理及實驗步驟——實驗外包。眾所周知，抗體與抗原之間的結合具有高度的特異性。免疫組化正是利用這一特性，即先將組織或細胞中的某些化學物質提取出來，以其作為抗原或半抗原去免疫實驗動物，制備特異性抗體，再用這種抗體（第1抗體）作為抗原去免疫動物制備第二抗體，并用某種酶（常用辣根過氧化物酶）或生物素等處理后再與前述抗原成分結合，形成抗原 - 一抗 - 二抗復合物，將抗原放大，由于抗體與抗原結合后形成的免疫復合物是無色的，因此，還必須借助于組織化學方法將抗原抗體反應部位顯示出來。通過抗原抗體反應及呈色反應，顯示細胞或組織中的化學成分，在顯微鏡下可清晰看見細胞內發生的抗原抗體反應產物，從而能夠在細...

醫療和預后有關的免疫組化。與醫療及預后有關的標記物主要分以下為三類:(1)cancer基因標記物:如cancer基因C-erbB2、c-myc、P53蛋白等，卵巢上皮性cancer中P53的過表達與cancer的擴散、分化、術后殘存cancer灶呈正相關;乳腺cancer中表達C-erbB2的浸潤性cancer患者預后差;肺cancer中突變型P53基因蛋白表達增高，PTEN基因表達減弱，提示cancer預后不良。(2)細胞增殖性標記物:cancer細胞增生是否活躍直接影響著臨床的醫療與預后，如表皮生長因子受體(EGFR)、Ki-67、PCNA、cycling等可對cancer細胞的增生做出評...

免疫組化的結果分析： 免疫組化實驗通常需要設置陽性對照、陰性對照（或替代對照）（陽性對照是排除方法和實驗系統有無問題；陰性對照與替代對照是排除有無非特異性染色）。一般情況下，陽性對照顏色的特點為：Ag定位，包漿、胞核、胞膜、間質具有結構性。且染色的強度不同（顏色深淺不一）；陰性對照的特點為：染色細胞與組織無區別，顏色具有彌散性，分布均勻。 英瀚斯生物可承接各類病理染色，包括免疫組化。 說明：免疫組化實驗可以對結果進行定量分析，但要實驗得到的必須是高質量的染色切片，要求背景染色淺且特異性染色較深，這樣分析的結果才會比較準確。 英瀚斯生物免疫組化，高效高質量出結果。貴州什么是...

免疫組化結果背景染色較深的原因有哪些？ （1）抗體濃度過高：一抗濃度過高是常見的原因之一。解決辦法是，每次使用新抗體前應當對其工作濃度進行測試，使每一抗體個體化，找到適合自己實驗室的理想工作濃度，既使是即用型的抗體也應如此，不能只簡單的按說明書進行染色。 （2）抗體孵育時間過長或溫度較高：解決辦法是，嚴格執行操作規程，比較好隨身佩帶報時表或報時鐘，及時提醒，避免因遺忘而造成時間延長。現在流行的二步法（Polymer）敏感性很高，要求一抗孵育的時間不是傳統的1小時，而是30分鐘，因此，要根據染色結果進行調整。 （3）DAB變質和顯色時間太長：DAB比較好現用現配，如有沉...

免疫組化指的是根據抗體與抗原特異結合的原理來檢測組織切片中的抗原（如蛋白）。immuno的詞根來自操作中所使用的抗體，而histo意味著組織。另一種類似的技術是免疫細胞化學（Immunocytochemistry，簡稱ICC）。這兩個詞大家經常混著用，看著好像差不多，但實際上還是有點區別。IHCvsICC對于IHC，組織是來自患者或動物，經過冷凍或石蠟包埋。將這些組織制成約4μm厚的切片，封片后再處理。通過這種方法，研究人員可觀察細胞組分的定位，同時維持周圍組織的原先結構。對于ICC，大部分細胞外基質及其他基質組分被去除，只剩下整個細胞來染色。ICC的來源可以是細胞懸液，來自患者或動物（如...

免疫組化分類中免疫酶標方法，英瀚斯生物為您介紹。免疫酶標方法是繼免疫熒光后，于60年代發展起來的技術。基本原理是先以酶標記的抗體與組織或細胞作用，然后加入酶的底物，生成有色的不溶性產物或具有一定電子密度的顆粒，通過光鏡或電鏡，對細胞表面和細胞內的各種抗原成分進行定位研究。免疫酶標技術是目前定位準確、對比度好、染色標本可長期保存，適合于光、電鏡研究等。免疫酶標方法的發展非常迅速，已經衍生出了多種標記方法，目前在病理診斷中廣為使用的當屬***法（過氧化物酶-抗過氧化物酶）、ABC法（卵白素-生物素-過氧化物酶復合物）、SP法（鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶）、即用型二步法（聚合物鏈接）等。免疫組化...

免疫組化實驗流程介紹： 英瀚斯生物為您整理總結免疫組化詳細步驟： 1、SP三步法 1）石蠟切片，常規脫蠟至水。 2）0.3%或3%H2O2去離子水（無色液體）孵育10-30分鐘，以滅活內源性過氧化物酶活性。 3）蒸餾水沖洗，PBS浸泡5分鐘 4）候選步驟：采用抗原修復：微波（建議30分鐘內4次中火）、高壓、酶修復方法。自然冷卻，再用3分鐘×3次. 5）血清封閉：室溫15-30分鐘，盡可能與二抗來源一致。傾去，勿洗。 6）滴加適當比例稀釋的一抗，37℃孵育2~3小時或4℃過夜（比較好復溫）。PBS沖洗，3分鐘×5次。 7）滴加生物素標記的...

醫療和預后有關的免疫組化。與醫療及預后有關的標記物主要分以下為三類:(1)cancer基因標記物:如cancer基因C-erbB2、c-myc、P53蛋白等，卵巢上皮性cancer中P53的過表達與cancer的擴散、分化、術后殘存cancer灶呈正相關;乳腺cancer中表達C-erbB2的浸潤性cancer患者預后差;肺cancer中突變型P53基因蛋白表達增高，PTEN基因表達減弱，提示cancer預后不良。(2)細胞增殖性標記物:cancer細胞增生是否活躍直接影響著臨床的醫療與預后，如表皮生長因子受體(EGFR)、Ki-67、PCNA、cycling等可對cancer細胞的增生做出評...

實驗失敗常見問題分析有哪些： 為什么在顯微鏡下觀察發現所有的切片都成陰性？ 答：這種現象主要是由操作不當導致，可能的原因有：1.染色操作不當，致使染色失敗；2.漏加一種抗體或者制備出的抗體沒有活性；3.緩沖液中有疊氮化鈉，抑制了酶的活性；4.復染或脫水劑使用不當等。建議逐一排查，找到原因后重新進行實驗。 在顯微鏡下觀察發現所有的切片都成陽性，這是為什么？答：與上一個問題類似，出現的原因也是試驗操作存在問題，可能的原因有：1.切片在染色過程中抗體過濃，或者干片了；使用的呈色底物溶液已變色或呈色反應時間過長；3.抗體溫育的時間過長等。 在顯微鏡下觀察發現切片的背景很深，...

免疫組化在什么情況下進行組織抗原修復，抗原修復的條件是什么？ （1）由于組織中部分抗原在甲醛或多聚甲醛固定過程中，發生了蛋白之間交聯及醛基的封閉作用，從而失去抗原性。通過抗原修復，使得細胞內抗原決定族重新暴露，提高抗原檢測率。 （2）修復方法從強到弱一般分為三種，高壓修復、微波修復、胰酶修復。修復液也分為若干種（具體的可以查閱相關資料，大量的：中性的、高pH的等）。 （3）微波修復，我們一般用6min*4次，效果不錯。 關于免疫組化的更多問題詳解，關注英瀚斯生物。 做免疫組化需要多少錢？湖北大鼠免疫組化要多少錢 免疫組化的結果分析： 免疫組化實驗通常需要設...

關于免疫組化的封閉：用和二抗來源一致的血清在保濕盒中于37℃孵育15~30min，然后甩去封閉用血清，勿洗；注意：封閉時間根據具體實驗調整；封閉液一般選用5%BSA或與二抗來源一致的血清，切記是BSA，不是PBS.很多論壇寫的是PBS,太坑了。①使用血清好還是BSA好？答：***是待檢樣本會非特異性的和蛋白結合，從而導致背景過高，因此可以用BSA或血清封閉掉這部分非特異性的結合，從這點看，BSA和血清沒有明顯區別。第二是待檢樣本中可能會有Fc受體，可以和抗體恒定區結合，與抗體特異性無關，封閉血清中有抗體，因此用血清可以封閉掉一抗及二抗和樣本Fc受體之間結合。BSA則無法封閉Fc受體。免疫組化相...

免疫組化中免疫膠體金技術，英瀚斯生物小編為您說明介紹。免疫膠體金技術是以膠體金這樣一種特殊的金屬顆粒作為標記物。膠體金是指金的水溶膠，它能迅速而穩定地吸附蛋白，對蛋白的生物學活性則沒有明顯的影響。因此，用膠體金標記一抗、二抗或其他能特異性結合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌A蛋白)等作為探針，就能對組織或細胞內的抗原進行定性、定位，甚至定量研究。由于膠體金有不同大小的顆粒，且膠體金的電子密度高，所以免疫膠體金技術特別適合于免疫電鏡的單標記或多標記定位研究。由于膠體金本身呈淡至深紅色，因此也適合進行光鏡觀察。如應用銀加強的免疫金銀法則更便于光鏡觀察。英瀚斯生物，組織包埋、切片、染色、免疫組化拍照、報...

免疫組化中IHC vs ICC的區別。英瀚斯生物為您說明。除了生物學來源，IHC和ICC在樣品處理的程度上也有所不同。ICC需要透化，要么通過固定過程，要么是單獨的透化步驟，這樣抗體才能與細胞內的靶點相結合。而IHC可能不要單獨的透化步驟，這取決于切片的厚度和固定方法。包埋在石蠟中的IHC切片必須進一步處理，才能進行抗體染色。一旦處理好樣品，IHC和ICC的染色操作就幾乎沒什么差異了。當然，就染色而言，根據所使用的抗體來優化還是少不了的。免疫組化流程是什么樣的？內蒙古做得好的免疫組化可以做什么 免疫組化實驗所用的抗體 免疫組化實驗中常用的抗體為單克隆抗體和多克隆抗體。單克隆抗體是一個B...

病理醫師日常工作中經常說的一句話應該就是“做個免疫組化吧”；不管是臨床醫師，還是患者，他們問的多的問題則是“為什么要做免疫組化？”病理醫師通過“特殊染色”來進行細胞的識別。這一做法的依據是特定細胞和組織中的成分不同、則化學性質不同，通過染色的方法則可以呈現不同顏色。不過，由于組織固定或儲存等，會造成相應物質的活性降低甚至消失，因而限制了特殊染色方法的應用。隨著免疫學研究的進展，根據抗原與相應抗體間特異性結合的性質，則有了現在免疫組化的方法：不同細胞、不同組織中抗原有一定差異，抗體與被測組織中的特定抗原結合，進而通過一定顯色方法將結合的抗體顯示出來。如有相應顯色，則證實可能有被測抗原；無顯色則可...

確定cancer分期，免疫組化技術應用于臨床可以進行處理哦，英瀚斯生物為您處理。cancer分期是判斷預后的一個指標，與是否浸潤、有無淋巴管或血管侵襲密切相關，而通過免疫組化方法可以判斷cancer是否浸潤、有無淋巴管或血管侵襲。層黏連蛋白和Ⅳ型膠原的單克隆抗體可以清楚的顯示基膜的主要成分，用于區分原位*和浸潤*，一旦上皮性*突破基膜為浸潤，未突破基膜為原位;顯示血管和淋巴管內皮細胞的標記物第八因子相關蛋白、D2-40等則可清楚顯示cancer對血管或淋巴管的浸潤。因此對許多cancer的良惡性鑒別及有無血管或淋巴管浸潤，免疫組化結果作為主要的鑒別依據。病理報告中的免疫組化到底有什么作用?山東...

免疫組化技術有哪些應用？ 定位和定性是免疫組化比較大的優勢。相比于其他蛋白檢測方法，免疫組化具有定位較直接準確、定性靈敏度高，是定位檢測分析優先方法，尤其對于有些因子的轉位研究十分有用。免疫組織化學的臨床應用主要包括以下幾方面：惡性**的診斷與鑒別定性；確定轉移性惡性**的原發部位；對某類**進行進一步的病理分型；軟組織**診斷；為臨床提供治療方案的選擇；近年來，隨著免疫組織化學技術的發展和各種特異性抗體的出現，使許多疑難**得到了明確診斷。免疫組化在**診斷和鑒別診斷中的實用價值受到了普遍的認可，其在低分化或未分化**的鑒別診斷時，準確率可達50%-75%。 南京有靠譜的能...

免疫組化染色切片的好壞直接影響著病理醫生對其染色結果的判斷，進而影響病理診斷，所以制作一張良好的免疫組化切片至關重要，它需要病理醫生與病理技師兩者間的相互協調，密切配合和共同努力，病理醫生選擇抗體，設置對照，判讀結果，指導技術;而技術人員進行實驗操作，保證染色質量。在免疫組化切片的制作過程存在多個環節，每一環節的失誤都可能影響檢測結果，如抗原保存，蛋白酶消化，增強技術及對抗體的管理、使用和試劑的濃度等等，因此制作一張高質量的免疫組織化學切片是多方面相互配合的結果。免疫組化方法步驟是什么？云南病理免疫組化實驗免疫組化分類中，免疫熒光方法，英瀚斯生物為您進行介紹。一開始建立的免疫組織化學技術。它利...