注意事項:1、酚紅和血清對CCK-8法的檢測不會造成干擾,可以通過減去空白孔中本底的吸光度而消除。2、CCK-8試劑的顏色為淡紅色,與含酚紅的培養(yǎng)基顏色接近,不注意的話容易產(chǎn)生漏加或多加。3、當在培養(yǎng)箱內培養(yǎng)時,培養(yǎng)板*外一圈的孔容易干燥揮發(fā),導致體積不準確而增加誤差。一般情況下,*外一圈的孔只加培養(yǎng)基,不作為測定孔用。4、金屬對CCK-8顯色有影響:終濃度為1mM的氯化亞鉛、氯化鐵、硫酸銅會5%、15%、90%的抑zhi顯色反應,使靈敏度降低。如果終濃度是10mM,將會100%抑zhi顯色反應。5、部分懸浮細胞由于染色比較困難,一般需要增加細胞數(shù)量并延長培養(yǎng)時間。在一定細胞數(shù)范圍內,MTT結晶形成的量與細胞數(shù)成正比。山東人誘導多能干試劑盒遺傳學和墓困組學
ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應的結果,使測定方法達到很高的敏感度。 ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。福建人臍靜脈內皮試劑盒基因表達分折臨床測定技術的發(fā)展主要在于方法學的發(fā)展,方法學的發(fā)展依托于試劑生產(chǎn)技術不斷進步更新和型標記物的應用。
報告基因被廣泛應用于篩選轉化的細胞和組織。在過去的10年里,熒光蛋白已經(jīng)成為活細胞成像研究中不可或缺的一部分。DsRED是可與其他篩選標記進行雙標記,同時又能避免植物葉綠素自發(fā)熒光的理想報告基因。本研究利用含有表達DsRED的雙元載體pKGWRR轉化核桃體細胞胚,并對這種紅色熒光蛋白可視報告基因對胚胎和再生植株的影響進行評估。結果表明,DsRED熒光強度在7~10d達到*高,24個存活的體細胞胚中有14個檢測到紅色熒光。這些E0胚每2周可以獲得25個全熒光E1胚和43個全熒光E2胚。DsRED陽性胚的發(fā)芽率達80%以上,獲得了45株可以檢測到紅色熒光的轉基因核桃植株。再生轉基因植株的組織中均能檢測到DsRED表達,包括其營養(yǎng)器guan的橫切面。轉化植株中能形成根的百分比(48.3%)與對照(53%)相近。在核桃體細胞胚的轉化體系中,DsRED的報告系統(tǒng)比綠色熒光蛋白(GFP)更穩(wěn)定可靠,且其具有直觀和非損傷的特點,提供了一種比b-葡萄糖醛酸酶(GUS)更有效的檢測轉化的手段。
您想要快速、準確的了解不同處理、來源的組織或細胞樣品之間某一類信號通路相關基因的表達情況嗎?為簡化基因分析研究,美國sciencell公司特推出GeneQueryTM qPCR試劑盒,這款產(chǎn)品能夠快速、簡單的獲得這些不同來源樣品之間您感興趣的信號通路相關基因群之間的精確表達倍數(shù)關系,并提供后續(xù)基因定量PCR 特異性引物序列信息。該試劑盒主要集中于生物學途徑、ai癥研究、遺傳性疾病和生物標志物等方面的研究,可在一個96 孔板內同時檢測96個相關基因的表達,少至0.1ng cDNA 就可快速準確的檢測和量化靶基因的表達。除了該試劑盒,還提供單獨的引物進行基因表達分析,這些引物組能特異性地識別和高效地擴增靶基因的cDNA。
可以應用以下等領域:
1、探索新型藥物靶向基因,
2、發(fā)現(xiàn)正常和病理細胞之間的信號異常,
3、確定藥物作用機制,
4、預測各種疾病的藥物療效,
5、評估藥物對基因表達和信號傳導的影響。
熒光素酶普遍具有靈敏度高、檢測快速、方便等特點。
ELISA(酶聯(lián)免疫吸附法)是一種快速檢測臨床和實驗樣品中蛋白質含量的方法,根據(jù)研究需求,有許多方式可供選擇,如直接ELISA,間接ELISA,競爭性ELISA和夾心ELISA等。ELISA是生物學實驗常用的一種技術,其具有快速、易于操作等優(yōu)點,但當條件不合適時,其往往不能給出*佳的結果,不能保持一致性和可復制性。
ELISA是Enzyme Linked ImmunoSorbent Assay的簡稱,即酶聯(lián)免疫吸附測定,是研究蛋白抗體的重要方法。它采用抗原與抗體的特異反應將待測物與酶進行直接或間接結合,然后通過酶與底物產(chǎn)生顏色反應,進行定性和定量分析。1971年Engvall和Perlmann發(fā)表了該方法用于IgG定量測定的文章,使得1966年開始用于抗原定位的酶標抗體技術發(fā)展成液體標本中微量物質的測定方法。
ELISA大致分為五種類型:直接法、間接法、競爭法、夾心法、捕獲包被法。
MTT法又稱MTT比色法,是一種檢測細胞存活和生長的方法。寧夏HMSC-ad試劑盒
細胞活力和增殖的研究對于評估細胞群對外部因素(如生長因子,抗sheng素和抗ai藥物)的反應非常重要。山東人誘導多能干試劑盒遺傳學和墓困組學
化學發(fā)光免疫分析技術的優(yōu)勢1.靈敏度高:靈敏度高是化學發(fā)光免疫分析關鍵的優(yōu)越性。化學發(fā)光免疫分析能夠檢出放射性免疫分析和酶聯(lián)免疫分析等方法無法檢出的物質,對疾病的早期診斷具有十分重要的意義。2.寬的線性動力學范圍:發(fā)光強度在4-6個量級之間,與測定物質濃度間呈線性關系。這與顯色酶聯(lián)免疫分析吸光度(OD值)2.0的范圍相比,優(yōu)勢明顯。雖然同位素放射免疫也有較寬的線性動力學范圍,但是放射性限制其應用。3.光信號持續(xù)時間長:化學發(fā)光免疫分析的光信號持續(xù)時間可達數(shù)小時甚至一tian,簡化了實驗操作及測量。4.分析方法簡便快速:絕大多數(shù)分析測定jin需加入一種試劑(或符合制劑)的一步模式。5.結果穩(wěn)定、誤差小:樣本本身發(fā)光,不需要額外光源,避免了外來因素的干擾(光源穩(wěn)定性、光散射、光波選擇器),分析結果穩(wěn)定可靠。6.安全性好及使用期長:到目前為止還未發(fā)現(xiàn)化學發(fā)光免疫分析試劑的危害性;另外這些試劑穩(wěn)定,保存期可達一年之久。山東人誘導多能干試劑盒遺傳學和墓困組學
上海中喬新舟生物科技有限公司
1、原代細胞:ScienCell(中國區(qū)正規(guī)一級代理)人源和動物源各種原代細胞。
2、培養(yǎng)基:原代細胞**低血清、無血清、無異源蛋白無動物成分培養(yǎng)基。
3、細胞培養(yǎng)試劑:胎牛血清、原代細胞轉染試劑盒、細胞實驗檢測試劑盒、細胞生長因子、ELISA試劑盒、定量PCR芯片試劑盒、DNA/RNA及細胞裂解物等。
4、細胞系(株):種類豐富(1000余種),已通過STR鑒定;提供細胞株完全培養(yǎng)基。
5、自研產(chǎn)品:支原體檢測/qing除試劑盒、端粒酶檢測試劑盒、人源/動物源ELISA試劑盒等系列產(chǎn)品。
6、技術服務:綠/紅色熒光蛋白標記、熒光素酶標記、慢bing毒介導基因沉默或過表達及穩(wěn)轉株的構建,細菌基因敲除、細胞基因敲除、小鼠基因敲除、血管生成功能學實驗。